Пгд эмбрионов при эко: цели исследования, особенности проведения генетического анализа

ООО МЦ «Петровские Ворота»

• Поликлиника
• Стационар
• Стоматология

• Пластическая хирургия
• ЭКО

м. Трубная, м. Цветной бульвар, м. Тверская 127051, г. Москва, 1-й Колобовский пер, д.

4

Преимплантационная генетическая диагностика – современная диагностика генных и хромосомных аномалий, которая осуществляется до переноса эмбрионов в маточную полость. Обследование проводится в рамках протокола ЭКО по назначению специалиста или по желанию пациента.

ПГД позволяет выявить хромосомные отклонения, а также вероятность передачи генетических заболеваний плоду еще до подсадки эмбрионов в матку.

Цели ПГД

Обследование проводится с целью выявления ряда генетических заболеваний, вызванных патологическими изменениями в структуре ДНК. Пациенты, сделавшие ПГД в рамках протокола ЭКО, гораздо реже сталкиваются с замиранием плода на ранних сроках беременности, самопроизвольными выкидышами и преждевременными родами.

• снижение вероятности зачатия ребенка с хромосомными отклонениями;
• «выбраковка» эмбрионов с ненормальным кариотипом;
• выяснение причин неудавшейся имплантации бластоцист в предыдущих процедурах ЭКО;
• определение резус-фактора плода;
• отсев эмбрионов с патологиями, не поддающимися лечению.

Периодическая модернизация оборудования в эмбриологической лаборатории клиники существенно расширяет спектр выявляемых аномалий.

С помощью данной медики специалисты из центра репродуктологии К+31 диагностируют более 150 видов генетических отклонений у эмбрионов.

Благодаря этому репродуктологи и эмбриологи выбирают для подсадки в маточную полость только жизнеспособные диплоидные клетки, что повышает шансы на рождение здорового ребенка.

Показания к ПГД

Преимплантационная диагностика может проводиться по желанию самих пациентов. Но в большинстве случаев к ПГД прибегают при наличии особых медицинских показаний:

• наследственные болезни у родителей;
• нарушенный сперматогенез у мужчин;
• генетические заболевания у близких родственников;
• наследственные патологии у одного из супругов;
• частые самопроизвольные аборты у женщин;
• более 2 неудачных попыток искусственного оплодотворения;
• возраст пациента старше 35-40 лет;
• генетические и хромосомные отклонения в ооцитах.

Результаты обследования позволяют оценить вероятность появления онкологических заболеваний, не подающихся эффективному лечению. Генетики также выясняют резус-фактор плода, что необходимо для исключения гемолитической болезни при резус-конфликте с организмом матери.

Какие заболевания диагностируют при помощи ПГД?

В клинике К+31 диагностику проводят специалисты в области генетики, репродуктологии и эмбриологии. Врачи с высокой степенью квалификации и большим практическим опытом отбирают для проведения ЭКО только жизнеспособные и здоровые эмбрионы.

• лимфома;
• миодистрофия;
• торзионная дистония;
• лейкемия;
• синдром Х-ломаной хромосомы;
• нейрофиброматоз;
• синдром Дауна;
• гемофилия;
• пигментозный ретинит;
• болезнь Гоше;
• муковисцидоз;
• ахондроплазия;
• фенилкетонурия;
• болезнь Геттингтона;
• ретинобластома;
• синдром Альперта;
• анеуплодия и т.д.

В случае обнаружения вышеперечисленных заболеваний эмбрионы выбраковываются и не используются для проведения ЭКО. Отбор наиболее жизнеспособных зародышей повышает шансы на благополучное зачатие и течение беременности в среднем на 17-23%.

Особенности проведения ПГД

Для проведения диагностики могут использоваться как яйцеклетки, так и эмбрионы. Во втором случае обследование будет более информативным, так как по его результатам можно выявить отклонения не только в материнском, но и в отцовском генетическом материале.

1. забор клеток из эмбрионов с помощью современного лазерного оборудования;
2. исследование биоматериала в генетической лаборатории.

Во время ПГД специалист проводит биопсию с целью получения одного бластомера из эмбриона, находящегося на стадии дробления. Процедура проводится на 3-5 сутки после оплодотворения ооцитов сперматозоидами. Биопсия не нарушает дальнейшего развития зародыша, а также не провоцирует развития каких-либо заболеваний в будущем.

В клинике К+31 забор клеток осуществляется при помощи лазерной пушки, что существенно снижает риск повреждения диплоидных клеток. После этого генетик проводит анализ ДНК, по результатам которого оцениваются риски развития у плода наследственных болезней.

Преимущества ПГД

В отличие от других видов генетического исследования, ПГД никак не влияет на план протокола ЭКО. Исключение касается только стадии стимуляции овуляции, которая осуществляется гораздо интенсивнее. Это позволяет получить большее количество ооцитов, из которых впоследствии можно будет отобрать наиболее качественные гаметы.

• высокую информативность генетического исследования;
• возможность проведения диагностики до переноса эмбрионов в маточную полость;
• снижение риска замирания плода и невынашивания беременности;
• возможность определения пола ребенка на стадии эмбриогенеза;
• увеличение шансов на успешную имплантацию бластоцист в эндометрий;
• сведение к минимуму рисков развития генетических патологий у ребенка;
• выявление причин неудавшейся имплантации в предшествующих попытках ЭКО;
• снижение вероятности многоплодной беременности;
• возможность выбора гистосовместимых эмбрионов для донорства сестре или брату.

ПГД – один из наиболее информативных методов исследования, позволяющих предотвратить зачатие ребенка с тяжелыми наследственными заболеваниями. В клинике К+31 диагностика проводится высококвалифицированными эмбриологами и генетиками. В случае необходимости пациенты могут заказать отдельное исследование на определение конкретного заболевания или целого комплекса генетических аномалий.

* — Травмпункт работает в круглосуточном режиме только для взрослых.
Для детей ведется прием детского травматолога в соответствие с расписанием.
Расписание уточняйте у операторов в кол-центре

Обращаем ваше внимание, что вся информация, включая цены, предоставлена для ознакомления и не является публичной офертой (ст.435 ГК РФ, cт. 437 ГК РФ)

Для получения более детальных консультаций по услугам и их стоимости обращайтесь в колл-центр по телефонам, указанным выше.

Цены действительны для потребителей — физических лиц.

sdf

Предимплантационная генетическая диагностика

Применение преимплантационной генетической диагностики возможно исключительно в рамках программы ЭКО, и в свое время стало настоящим прорывом в области вспомогательных репродуктивных технологий.

Возможность определять генетические нарушения на стадии доимплантационного развития – шанс значительно повысить эффективность лечения бесплодия и достигнуть главной цели – рождения здорового малыша в семье.

Показания к ПГД

Преимплантационная генетическая диагностика рекомендуется в случае диагностированных генетический нарушений у одного или обоих будущих родителей.

Если у мужчины и женщины обнаружены нарушения в кариотипе,ПГД является одним из важнейших этапов в алгоритме предупреждения рождения ребенка с патологией и наступления беременности плодом с патологией.

В данном случае ПГД предполагает исследование эмбрионов на анеуплоидии хромосом, вовлеченных в транслокации, а также на самые распространенные хромосомные нарушения (синдромы Дауна, Патау, Эдвардса).

Рис.1. Анеуплоидии у эмбриона по хромосомам 15, 20 и 21 у пациентки 40 лет методом NGS.

ПГД назначают при неудачах ЭКО и привычном невынашивании беременности. Как при естественном зачатии, так и в рамках программ ВРТ, основное количество (75-80%) прерываний беременности приходится на I триместр.

Причинами невынашивания беременности могут быть как генетические отклонения эмбриона, так и многоплодие. ПГД при невынашивании беременности может помочь уменьшить частоту самопроизвольного прерывания. У пациентов с выкидышами в анамнезе уровень спонтанных абортов удалось снизить до 16.

7% против ожидаемых 36.5%, у женщин старше 35 — до 12% против ожидаемых 44.5%.

Рис.2. Биопсия клеток трофэктодермы у эмбриона 5 дня развития.

Преимплантационная генетическая диагностика незаменима и в случае мужского фактора бесплодия, при выявлении высоких показателей генетических нарушений в сперматозоидах.

Изучение хромосом в сперматозоидах, полученных от мужчин с олиго/астено/ тератозооспермией (ОАТ), показало повышенный уровень анеуплоидии (неправильный набор хромосом) по сравнению с мужчинами без отклонений в показателях спермограммы.

У мужчин с нормальным кариотипом показатель частоты анеуплоидии половых хромосом в сперматозоидах наблюдали при олигоастенотератозооспермии в 4 раза чаще, чем при нормальной спермограмме.

Применение для оплодотворения сперматозоидов с патологическим набором хромосом приводит к формированию эмбриона с генетической патологией, а затем, зачастую, к замиранию и невынашиванию беременности, или рождению ребенка с патологией.

Рис.3. Генетическая диагностика у эмбрионов методом КФ-ПЦР.

Репродуктолог рекомендуют проведение ПГД, если возраст женщины превышает 35 лет, так как, к сожалению, существует медицинская статистика, позволяющая говорить, что в позднем репродуктивном периоде повышается риск рождения ребенка с генетической патологией, в том числе с синдромом Дауна и серьезными заболеваниями, пороками развития различных органов и систем.

Показания к проведению ПГД

• случаи рождения детей с наследственной и врожденной патологией в анамнезе;
• диагностированные сбалансированные хромосомные аберрации (транслокации и др.) в паре;
• возраст женщины от 35 лет;
• 2 и более неудачных попыток ЭКО в анамнезе;
• замирание и невынашивание беременности в анамнезе, а также случаи пузырного заноса;
• высокий процент сперматозоидов с генетической патологией у мужчины;
• каждой семье, которая имеет желание провести ПГД в рамках программы ЭКО, чтобы быть уверенными в здоровье будущего ребенка и повысить шансы на успех лечения.

Рис.4. Уровень наступления беременности в рамках программы ЭКО с проведением генетической диагностики и без.

Возможности ПГД

Преимплантационная генетическая диагностика дает широкие возможности по выявлению генетических нарушений эмбрионов и позволяет осуществлять перенос перспективного, жизнеспособного эмбриона.

Преимплантационная диагностика позволяет успешно реализовывать и актуальную тенденцию современной репродуктивной медицины – селективный перенос одного здорового эмбриона и наступление беременности одним плодом, так как многоплодная беременность имеет свои особенности и акушерские риски.

Рис.5. Результаты анализа, полученные с помощью метода CGH и NGS.

Таким образом проведение ПГД достоверно помогает:

• увеличить частоту наступления беременности;
• увеличить частоту благополучного вынашивания беременности;
• снизить частоту наступления многоплодных беременностей;
• снизить риски рождения ребенка с патологией.

Как и когда проводится ПГД?

Проведение преимплантационной генетической диагностики включает 2 этапа: получение клеток от эмбрионов с помощью специального лазерного оборудования, которое является безопасным для развивающихся эмбрионов; исследование полученного материала в генетической лаборатории.

Забор клеток для ПГД, как правило, проводится на 5-е сутки развития, на стадии бластоцисты. Именно в этот период у эмбриона уже достаточно много клеток, и, соответственно, ДНК для анализа, что позволяет получать более достоверные и надежные результаты диагностики.

Пгд при эко

Задача исследования заключается в выяснении достоверной информации о генетическом статусе эмбриона, до того, как будет произведен его перенос в полость матки.

Таким образом, среди полученных после искусственного оплодотворения эмбрионов, Пгд при эко помогает отобрать те, которые не несут в себе патологий. Это позволяет родить здорового ребенка за минимальное количество попыток ЭКО.

Исходя из особенностей методики, становится очевидным, что это Пгд при эко является решающим исследованием в определении качества эмбриона, а также – при отбраковке остальных, непригодных к пересадке в матку женщины.

Виды ПГД диагностики

Существует четыре вида ПГД, которые могут быть проведены в Калуге, на различном лабораторном оборудовании, а именно:

1. Флуоресцентная гибридизация (FISH) – исследует не весь набор хромосом. Но для проведения анализа достаточно четырех часов. Широко применяется в репродуктивных клиниках.
2. Сравнительная геномная гибридизация (CGH) – направлена на анализ всех хромосом. Ее минус — значительные временные и материальные затраты.
3. Полимеразная цепная реакция (PCR) – основная задача заключается в определении моногенной мутации на уровне хромосом, с предварительным обследованием пары на предмет мутации хромосом.
4. Now-Generation Sequencing. Последний вид ПГД дает возможность наиболее тщательной оценки всего генома эмбриона и выявлению в нем всех возможных нарушений.

Кому и в каких случаях нужна ПГД диагностика?

Это могут быть пациенты – носители мутаций в тех генах, которые в дальнейшем приводят к развитию наследственных патологий. Например, это такие болезни, как: мироцидоз, миодистрофия, гемофилия и т.д.. Задача специалиста, – выбрать эмбрион, который не является носителем данной болезни.

Также нужно упомянуть о случаях, когда у пациентов наблюдаются хромосомные делеции — изменения в кариотипе. Нормальный кариотип — это 46 хромосом, две из которых половые.

Имеют место ситуации, когда хромосомы обмениваются своими участками или кусок одной из них, соединяется с другой. При наличии подобных нарушений вероятность успешной беременности крайне низка. Значительно выше вероятность замершей беременности.

Пациентам с диагностированными генетическими патологиями рекомендуется проведение ЭКО с предимплантационной генетической диагностикой эмбриона.

Диагностика для пациентов с нормальным кариотипом

Если у пары есть история рождения ребенка с хромосомными нарушениями или были неудачные попытки ЭКО, а именно перенос хорошего материала, но без имплантации, то врач также порекомендует проведение данного исследования.

Целью проведения скрининга на 24 хромосомы является выявление эмбрионов, имеющих нормальный кариотип. Так, например, такая патология как синдром Дауна, является следствием трисомии по 21 хромосоме. Не менее серьезную опасность несет в себе и трисомия по 16 хромосоме. Вероятность численных нарушений хромосомного ряда, чаще всего свойственна женщинам в позднем репродуктивном возрасте.

Этапы проведения ПГД

У предназначенных к исследованию эмбрионов эмбриолог отбирает несколько клеток (методом биопсии). На этой стадии развития отбор клеток не вредит дальнейшему развитию зародыша. После этого материал передается в генетическую лабораторию. Если исследование занимает длительное время, эмбрион подвергается заморозке для дальнейшего хранения. А перенос осуществляется в следующем цикле.

Когда приходят результаты анализа, по заключению генетика видно, что можно переносить эмбрионы, например, под первым, вторым и третьим номерами. А остальные нужно исключить из процедуры. Исходя из полученной информации, пациент начинает подготовку в соответствии с протоколом крио переноса эмбрионов.

Перед переносом эмбриона в матку может проводиться вспомогательный лазерный хетчинг. Это процедура, при которой эмбриолог рассекает оболочку зародыша. В дальнейшем это облегчает его имплантацию во внутреннюю оболочку матки 

Как процедура биопсии влияет на дальнейшее развитие эмбриона?

Биопсия качественного эмбриона 3-5 дня развития не влияет на развитие эмбрионов. Это подтверждается мировой практикой.

На данном этапе развития, клетки эмбриона полипотентные, то есть они взаимозаменяемые на функциональном уровне. Таким образом, забор нескольких клеток никакого вреда эмбриону не наносит. Напротив, перенос эмбриона, который прошел биопсию и признан пригодным для переноса, значительно увеличивает шансы на беременность после ЭКО.

Анализ Пгд при эко

Проводится с целью оценки качества имеющихся эмбрионов. После проведения оценки, эмбриолог делает пометку в эмбриолисте, с указанием качества эмбриона. Предположим, это может 2А или 4Б. О любых особенностях или отклонениях также делается пометка. Эмбрионы качества А считаются отличными, B – хорошими. С и Д – более низкое качество.

Преимущества процедуры ПГД

Основное преимущество заключается в переносе, в рамках протокола ЭКО, эмбриона без хромосомных патологий. Это существенно, порядка на 80%, снижает риск появления на свет ребенка с генетическими дефектами. В данном случае, потраченное время и деньги полностью окупаются целесообразностью процедуры.

Среди других важных преимуществ стоит отметить:

• минимизация вероятной замершей беременности;
• исключение многоплодия в 95% беременности после ЭКО;
• дополнительные 10% к успешной имплантации;
• значительно повышается вероятность отсутствия осложнений.

Риски ПГД анализа

В первую очередь, риски такого анализа связаны с вероятностью повреждения эмбриона, от которого производится забор нескольких клеток. Но они не слишком значительны.

Исследование Пгд при эко, к сожалению, имеет погрешность, и варьируется она в пределе от 8 до 10%.  Поэтому существует вероятность подсадки ПГД эмбриона, с ошибочным диагностированием его качества. Когда, на самом деле, он имеет ту или иную патологию.

То, чего опасаются многие пациентки, – отмена переноса в рамках протокола ЭКО с ПГД в Калуге. По результатам биопсии, порядка в 20% случаев, эмбриологи переносят или полностью останавливают процедуру, до момента получения новых яйцеклеток, их оплодотворения, а также повторной биопсии готовых эмбрионов. Но в конечном итоге, ПГД в Калуге гарантирует рождение здорового ребенка.

Результаты ПГД

На основании проведенного ПГД, результаты указывают на возможность подсадки качественного эмбриона под определенным номером или нескольких из них. Если же результат указывает на наличие мутаций, то эмбрион, от которого производился забор клеток, не используется для зачатия.

Также, на основании полученных данных, можно определить пол ребенка. Этот вопрос, конечно, интересен для будущих родителей; но следует знать, что в РФ перенос эмбриона определенного пола разрешен только при наличии риска передачи наследственного, сцепленного с полом, заболевания.

Стоимость обследования ПГД эмбрионов

Цена ПГД напрямую зависит от технологии проводимого анализа. Так, например, самыми дешевыми является:

• ПГД 24 хромосомы + транслокация (до 2 эмбрионов) – до 70 000 рублей;
• ПГС на 24 хромосомы (1 эмбрион) – до 20 000 руб.

Что касается диагностики моногенного заболевания + 24 хромосомы с предварительным этапом, а также анализом клеток из 8-ми эмбрионов, то  стоимость ПГД в таком формате, варьируется в пределах от 180 000 до 210 000 тыс. руб.

Таким образом, конечная цена зависит именно от выбранного вида ПГД, а также политики ценообразования самой клиники. Стоит отметить, что обследование родителей в цену не входит.

Преимплантационная генетическая диагностика

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) — диагностика генетических заболеваний у эмбриона человека перед имплантацией в слизистую оболочку матки, то есть до начала беременности. Обычно для анализа проводится биопсия одного бластомера у эмбриона, находящегося на стадии дробления (4-10 бластомеров).

При материнском носительстве генетической патологии возможна биопсия 1-го и 2-го полярных телец яйцеклетки до оплодотворения. В последние годы наблюдается тенденция к переходу на биопсию трофэктодермы (внешнего слоя клеток) на стадии бластоцисты (пятый день развития эмбриона)[1].

 Преимплантационная генетическая диагностика рассматривается в качестве способа альтернативного пренатальной диагностике. Его главное преимущество заключается в том, что при его использовании отсутствует селективное прерывание беременности, а вероятность рождения ребёнка без диагностируемого генетического заболевания достаточно высока.

Таким образом, ПГД является дополнительной процедурой к вспомогательным репродуктивным технологиям и требует экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

История

Идея проведения преимплантационной генетической диагностики появилась ещё до рождения первого ЭКО-ребёнка. В 1967 году была опубликована статья Р.Эдвардса (R. G. Edwards) и Р. Гарднера (R. L.

Gardner) о проведении биопсии эмбрионов кролика для определения пола до имплантации, в которой авторы предсказывали появление аналогичных технологий у человека[2].

Однако преимплантационная генетическая диагностика у человека стала возможной лишь в начале 90-х годов, когда был достигнут достаточный технологический уровень экстракорпорального оплодотворения, а также разработана полимеразная цепная реакция, позволяющая проведение анализа ДНК в единичных клетках.

В 1989 году проведена первая успешная попытка определения пола при помощи ПЦР-анализа бластомера, взятого у эмбриона на стадии дробления (6-8 бластомеров)[3]. Первые успешные роды после подобной процедуры у супружеских пар с риском по рецессивному Х-сцепленному заболеванию состоялись в 1990 году[4].

В 1990 году произведена диагностика моногенного заболевания до оплодотворения, методика включала ПЦР-анализ полярных телец яйцеклетки[5].

Первое рождение ребёнка после преимплантационной ПЦР-диагностики моногенного заболевания (муковисцидоза) состоялось в 1992 году[6].

В дальнейшем для определения пола эмбриона, а также хромосомных аномалий стали использовать метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH). Начиная с 2012 года, метод FISH для определения хромосомных аномалий постепенно вытесняется методом сравнительной геномной гибридизации. Метод ПЦР остался незаменимым для диагностики моногенных заболеваний.

Показания для проведения преимплантационной диагностики

Преимплантационная генетическая диагностика показана супружеским парам, у которых имеется носительство хромосомной перестройки или моногенного заболевания. Примерами моногенных заболеваний могут служить муковисцидоз, болезнь Тея — Сакса, серповидноклеточная анемия, гемофилия А, миодистрофия Дюшенна и многие другие.

Кроме этого, преимплантационная генетическая диагностика проводится у супружеских пар с повышенным риском врождённых аномалий у детей, который не связан с носительством диагностированных мутаций.

К таким случаям относятся пары, где возраст матери превышает 35 лет; где возраст отца выше 39 лет; если у отца наблюдаются тяжёлые нарушения сперматогенеза; у супружеских пар с привычным невынашиванием; у супружеских пар с повторяющимися неудачными попытками ЭКО.

В случае неопределённого повышенного риска рождения ребёнка с врождёнными аномалиями преимплантационная генетическая диагностика проводится для девяти хромосом, с которыми связаны наиболее часто встречающиеся врождённые заболевания.

Это хромосома 13 (синдром Патау), хромосома 15 (синдром Прадера-Вилли), хромосома 16, хромосома 17, хромосома 18 (синдром Эдвардса), хромосома 21 (синдром Дауна), хромосома 22 (синдром «кошачьих зрачков»), а также половые хромосомы X и Y (различные численные аномалии, включая синдром Шерешевского — Тернера и синдром Кляйнфельтера).

Преимплантационную генетическую диагностику проводят в некоторых случаях, не связанных с возможной генетической патологией плода, целью такой диагностики является рождение ребёнка с определёнными генетическими характеристиками. К таким случаям относится, например, преимплантационная генетическая диагностика, проводимая для предотвращения резус-конфликта.

Существуют случаи, когда комбинируются несколько предпосылок к преимплантационной генетической диагностике. Одним из таких примеров является случай, когда при помощи преимплантационной генетической диагностики был рождён HLA-совместимый донор для клеточной терапии анемии Фанкони у пробанда[7]. В данном случае была исключена анемия Фанкони и был подобран нужный тип гистосовместимости.

Проведение

В этом разделе не хватает ссылок на источники информации.Информация должна быть проверяема, иначе она может быть поставлена под сомнение и удалена.Вы можете отредактировать эту статью, добавив ссылки на авторитетные источники.Эта отметка установлена 19 ноября 2014 года.

Проведение преимплантационной диагностики возможно только в рамках лечебного цикла ЭКО, а точнее экстракорпоральное оплодотворение с интраплазматической инъекцией сперматозоидов (ИКСИ), то есть сперматозоид вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью микрохирургических инструментов.

Процедура ИКСИ необходима в связи с тем, что при обычном ЭКО к яйцеклетке добавляется большое количество сперматозоидов. Затем, при заборе полярных телец или бластомеров, есть риск попадания в анализ вместе с клеткой эмбриона генетического материала сперматозоида, не участвовавшего в оплодотворении.

Подготовка к лечебному циклу и сам лечебный цикл ЭКО с ПГД практически не отличается от обычного лечебного цикла ЭКО:

1. женщина получает гормональные препараты для стимуляции суперовуляции;
2. производится трансвагинальная пункция фолликулов;
3. оплодотворение яйцеклеток сперматозоидами проводится в условиях эмбриологической лаборатории;
4. перенос эмбрионов в матку проводится на 5-6 сутки.

Диагностика генетических нарушений

Созревание яйцеклетки

Если генетическое нарушение наследуется от женщины, то можно отобрать «здоровые» эмбрионы, пройдя процедуру тестирования только полярных телец, не трогая сам эмбрион. Также можно протестировать только бластомеры. Либо может проводиться последовательное изучение полярных телец, затем бластомеров.

Какая именно схема ПГД будет применяться для каждого конкретного случая, определяется на консультации с врачом-генетиком либо специально подготовленным ПГД-консультантом при планировании ПГД.

При первом делении мейоза ооцит 1-го порядка делится, в результате чего образуются ооцит 2-го порядка и небольшое первое редукционное тельце (обе клетки с гаплоидным набором хромосом). При втором делении мейоза в результате деления ооцита 2-го порядка образуются одна яйцеклетка и второе редукционное тельце. Первое редукционное тельце иногда тоже делится на две одинаковые мелкие клетки. В результате этих преобразований ооцита 1-го порядка образуются одна яйцеклетка и три редукционных тельца, где и яйцеклетка, и редукционные тельца имеют гаплоидный набор хромосом. Таким образом, можно исследовать полярные тельца, чтобы установить унаследовала ли яйцеклетка генетический дефект.

После оплодотворения яйцеклеток сперматозоидами в условиях эмбриологической лаборатории эмбрион развивается — клетки делятся. На третий день эмбрион состоит из 6-8 бластомеров.

И на третий день происходит забор биологического материала для генетического исследования — так называемая «биопсия эмбрионов», то есть извлечение из эмбриона одного бластомера (а иногда также и полярных телец) с помощью специальных микроинструментов. Процедура не нарушает дальнейшего развития эмбриона.

В то время пока выполняется генетическая диагностика, эмбрионы продолжают развиваться в соответствующей культуральной среде до переноса в полость матки на 5-е сутки развития. К этому времени эмбрион должен достичь стадии бластоцисты.

Перед переносом эмбриолог оценивает строение и форму эмбрионов. Результат генетической диагностики сопоставляется с морфологией эмбрионов и делается заключение о том, какие эмбрионы рекомендуются для переноса в матку. Для переноса отбирают самые лучшие по морфологическим характеристикам эмбрионы без генетических нарушений.

Анализ проводится в очень сжатые сроки. Для анализа бластомеров доступно всего 2 суток, так как эмбрион не может продолжать своё развитие вне организма матери далее стадии бластоцисты (5-е сутки после оплодотворения), поэтому исследование обязательно должно быть выполнено за это короткое время.

Альтернативным подходом является проведение ПГД в криоцикле. В таком случае биопсия производится на 5 день развития, и сразу после неё эмбрионы подвергаются криоконсервации.

В последующий месяц проводится генетическая диагностика и рекомендованные эмбрионы без мутаций переносятся в матку при следующем цикле.

Практика разобщённого цикла имеет ряд преимуществ: меньший риск гиперстимуляции, большее количество материала и времени для анализа, менее травматичная для эмбриона процедура биопсии. Недостатком криоцикла является большее время от начала стимуляции до переноса эмбриона[1].

Используемые генетические методы

В этом разделе не хватает ссылок на источники информации.Информация должна быть проверяема, иначе она может быть поставлена под сомнение и удалена.Вы можете отредактировать эту статью, добавив ссылки на авторитетные источники.Эта отметка установлена 19 ноября 2014 года.

1. Для числовых и структурных хромосомных нарушений применяется метод FISH (флуоресцентная гибридизация in situ). Обычно проводится для анализа числовых нарушений трёх, пяти или семи хромосом, чаще всего хромосом 13, 18, 21, X и Y.
2. Современной альтернативой методу FISH является метод сравнительной геномной гибридизации на микрочипах (СГС).

   СГС позволяет протестировать все хромосомы одновременно.

3. При проведении ПГД моногенных заболеваний применяется метод ПЦР.

Метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) — метод цитогенетического анализа, используемый для выявления и локализации специфических последовательностей ДНК на метафазных хромосомах и в интерфазных ядрах.

В этом методе используются ДНК-зонды, которые представляют собой нуклеотидную последовательность ограниченного размера, комплементарную определённому участку ядерной ДНК. Зонд несёт «метку», то есть содержит нуклеотиды, связанные с флуорофором (молекулу, способную к флуоресценции).

После процедуры гибридизации в случае образования гибридной молекулы ДНК-зонда и ДНК мишени на исследуемом цитогенетическом препарате можно наблюдать свечение специфических последовательностей ДНК на хромосомах или в ядрах при помощи флуоресцентного микроскопа.

Полимеразная цепная реакция — это метод, основанный на многократном избирательном копировании определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.

Преимущества преимплантационной диагностики

В этом разделе не хватает ссылок на источники информации.Информация должна быть проверяема, иначе она может быть поставлена под сомнение и удалена.Вы можете отредактировать эту статью, добавив ссылки на авторитетные источники.Эта отметка установлена 19 ноября 2014 года.

• Выбор и перенос в матку только тех эмбрионов, которые не имеют хромосомных патологий
• Снижение риска рождения ребёнка с определёнными генетическими дефектами
• Снижение риска невынашивания (примерно в 2 раза)
• Снижение риска многоплодия (примерно в 2 раза)
• Увеличение шанса на успешную имплантацию (примерно на 10 %)
• Увеличение шансов на благополучное рождение ребёнка (примерно на 15-20 %).

Риск при проведении преимплантационной диагностики

В этом разделе не хватает ссылок на источники информации.Информация должна быть проверяема, иначе она может быть поставлена под сомнение и удалена.Вы можете отредактировать эту статью, добавив ссылки на авторитетные источники.Эта отметка установлена 19 ноября 2014 года.

• Риск случайного повреждения эмбриона (

Генетическая диагностика эмбриона (ПГД)

Предимплантационная генетическая диагностика ПГД – это метод исследования генома до переноса эмбриона в полость матки. Главная цель – выбор эмбриона для переноса без генетических патологий, носителями которых являются родители, и выявление патологий на пе

Данный метод ПГД применяется для определения наличия моногенных заболеваний и имеет явное преимущество, которое не вызывает споров о его полезности. Это единственный способ избежать передачи генетического заболевания и, чтобы будущие родители не столкнулись с возможностью родить больного ребенка и, следовательно, с решением прервать беременность.

·         SGP/CCS/ПГД-А

Данный анализ позволяет не только выбрать «качественные» зародыши, но, а также, здоровые в генетическом плане, что снижает риск прерывания беременности, как самопроизвольных абортов, так и искусственного прерывания, в случае выявления патологии на перинатальном этапе.

Когда проводится ПГД?

— Моногенный ПГД / ПГД-М:

Проведение ПГД показано парам с высоким риском генетических заболеваний, которые хотят родить здорового ребенка. Благодаря этому анализу, возможность родить здорового ребенка повышается в несколько раз.

— SGP/CCS/ПГД-А

Анализ SGP показан женщинам в солидном возрасте, с привычным невынашиванием, особенно на ранних сроках беременности, или самопроизвольными абортами; парам после многократных неудачных попыток ЭКО и парам с высоким генетическим риском.

Как проводится исследование?

Моногенный ПГД / ПГД-М

В первую очередь для того, чтобы провести анализ ПГД необходимо иметь генетический анализ будущих родителей. По этой причине, первый этап анализа — генетический анализ родителей.

То есть, обнаружить генетические риски (мутации), которые вызвали болезнь.

После получения результата, мы должны разработать правильный метод диагностики будущих зародышей в лаборатории экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) (информативность).

После того, как предыдущие этапы ПГД завершены (генетический анализ и информативность), мы сможем начать проведение цикла ПГД. Для этого, пара должна будет провести процедуру экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Мы должны будем подождать пока эмбрионы, полученные в этом процессе, не разделятся, чтобы сделать забор нескольких клеток эмбриона (биопсия эмбриона). Мы проанализируем забранный материал в лаборатории молекулярной биологии, чтобы узнать здоровы ли биопсийные эмбрионы.

Цель анализа — выбор эмбриона для пересадки без генетических патологий, носителями которых являются родители, и здоровая беременность.

SGP/CCS/ПГД-А:

В этом случае проводится биопсия трофэктодермы (участок эмбриональной ткани, из которой развивается плацента) бластоциста, и подсчитывается количество хромосом эмбриона, чтобы выбрать эмбрионов с нормальным количеством хромосом.

Какие болезни проявляются при ПГД?

Генетическое исследование сформированных эмбрионов способствует выявлению множества наследственных заболеваний, при которых известна мутация гена, ответственного за заболевание.

ПГД проводится независимо от типа наследственного заболевания:

• Парам, в которых один из членов является носителем генетического заболевания, и которое передается плоду аутосомно-доминантным типом наследования (50% детей наследуют заболевание).
• Парам, в которых женщина является носителем генетического заболевания, связанного с полом (50% ее детей наследуют заболевание).
• Парам, в которых оба члена пары являются носителями генетического заболевания, которое передается детям аутосомно-рецессивным типом наследования (25% детей наследуют заболевание). 

Преимущества SGP/CCS/ПГДА

До сих пор обсуждается вопрос о преимуществах ПГД, для анализа хромосомных мутаций (SGP): увеличивается ли процент успешной имплантации эмбриона при вспомогательных методах оплодотворения? Далее, представлены основные плюсы и минусу диагностики.

Улучшение выбора эмбрионов

Только эмбрионы с нормальным количеством хромосом гарантируют рождение здорового ребенка. Таким образом, в случае качественных эмбрионов, с помощью анализа SGP, врачи могут обнаружить и выбрать эмбрионы с нормальным количеством хромосом, и исключить все те, которые не рекомендуются к переносу и не гарнируют рождение здорового ребенка, даже если это качественные эмбрионы.

Повышается успешность терапии бесплодия

Существуют генетические мутации, которые несовместимы с жизнью и затрудняют развитие эмбриона на раннем этапе и даже имплантацию в матку. SGP позволяет исключить эти эмбрионы, оптимизируя количество переносов.

Избегать перенос эмбрионов, которые вызывают аборт или рождение детей с различными синдромами

Среди хромосомных мутаций существует несколько менее губительных для имплантации эмбриона, но которые затрудняют здоровое развитие зародыша и могут вызвать аборт, или же проявятся различные заболевания у ребенка, как например: синдром Дауна, Патау или Эдвардса. Все эмбрионы, которые могут привести к данным заболеваниям или ситуациям, будут исключены благодаря SGP.

Уменьшить время ожидания успешной беременности

С помощью SGP, мы избегаем переноса эмбрионов, которые не гарантируют рождение здорового ребенка, так как они будут исключены. После исследования, мы отберем только те эмбрионы, которые гарантируют успешную беременность, и не будем терять время на перенос эмбрионов, которые не будут развиваться и не гарантируют рождение здорового ребенка.

Низкая стоимость

Возможно, многие считают, что стоимость предимплантационной генетической диагностики эмбрионов высока, но тщательное исследование каждого эмбриона помогает избегает, замораживание и содержание эмбрионов, которые очевидно здоровы, но генетически нет. Благодаря этому анализу, Вы сможете избежать расходов за переносы эмбрионов, которые не гарантируют здоровую и успешную беременность.

Улучшить психологическое благополучие

Предимплантационная генетическая диагностика эмбрионов позволяет уменьшить уровень сомнений пациентов. С одной стороны, диагностика гарантирует здоровый эмбрион и применение передовой технологии. С другой стороны, снижает вероятность аборта, эмоциональный стресс, особенно в случае пациентов с невынашиванием плода или многократными неудачными попытками.

Отрицательные моменты генетической диагностики SGP/CCS/ПГДА

Инвазивная процедура

При SGP необходимо провести биопсию эмбриона для генетического анализа. Однако, последние достижения в этой сфере, максимально снижают возможные побочные эффекты биопсии. Биопсия на 5 сутки развития эмбриона, а не на 3, менее травматична для зародыша, и позволяет использовать именно этот способ для выбора жизнеспособного эмбриона.

Цикл без переноса

В некоторых случаях, с возрастом количество генетически аномальных эмбрионов значительно возрастает, а доля нормальных снижается. В этих случаях, существует возможность, что, после анализа SGP, все эмбрионы аномальны и не допустимы к переносу. И кроме вызванных неудобств в связи с прерыванием процедуры, добавляется эмоциональная боль потери.

Мозаицизм эмбриона

Широко известно, что человеческие зародыши обладают определенной степенью мозаицизма, однако диагностировать ее сложно.

В настоящее время, благодаря развитию различных генетических анализов, мы можем определить отличаются ли клетки эмбриона генетически (мозаика). Остается определить, влияет ли этот факт на эмбрион каким-либо образом.

Для оценки этого факта клиника Instituto Bernabeu проводила различные исследовательские работы.

SGP как скрининг

SGP исследует внешние ткани эмбриона и не затрагивает ткани (внутреннюю клеточную массу), которые влияют на правильное развитие ребенка, так как существуют научные работы, которые доказали высокую степень корреляции между ними. Поэтому, мы считаем, что взятый при биопсии материал дает информацию обо всем эмбрионе.

Трудность в принятии решения

Многим парам, по этичным и эмоциональным причинам, больно принять решение исследования своего эмбриона. (В наших клиниках существует психологическое и профессиональное консультирование. Мы поможем Вам на этом этапе, но принятие решение всегда будет оставаться за Вами).

Новости центра

01 декабря, 2019

Рождение здорового ребенка — огромное счастье для родителей. Но особую радость от этого события чувствуют семьи, в которых велик риск передачи потомству наследственных заболеваний.

И если еще несколько десятков лет назад предсказать, будет ли ваш малыш здоров, никто не мог, то сегодня передовые достижения науки позволяют это сделать с высокой точностью — с помощью предимплантационной генетической диагностики эмбрионов (ПГД) в программе ЭКО.

Что представляет собой ПГД?

• Предимплантационная генетическая диагностика — это специальное молекулярно-биологическое тестирование хромосомного набора яйцеклеток или клеток эмбриона, проводимое до переноса зародыша в полость матки.
• Данный вид исследования позволяет выявить около 150 наследственных заболеваний, значительно повышает эффективность лечения бесплодия методами ВРТ, а также существенно снижает вероятность появления на свет больного малыша.
• Необходимость проведения ПГД не вносит существенных изменений в план лечения пациентов в протоколе ЭКО, поскольку все дополнительные манипуляции осуществляются в лаборатории. Однако для проведения ЭКО с ПГД требуется большое число эмбрионов, поэтому стимуляция яичников женщины может быть более активной.

Показания к проведению ПГД и цели исследования

Данный метод диагностики используют только при наличии особых медицинских показаний: кандидатами на ПГД становятся семейные пары, у которых значительно повышен риск передачи потомству серьезных генетических проблем.

Целями ПГД могут быть:

• снижение риска рождения ребенка с генетическими аномалиями у носителей генных заболеваний
• выявление эмбрионов с генетической предрасположенностью к тяжелым болезням
• «отсев» эмбрионов с аномалиями кариотипа
• выявление причин отсутствия имплантации в предыдущих попытках ЭКО
• проведение НLA-типирования для подбора будущего ребенка в качестве донора больному брату или сестре
• определение пола для предотвращения дальнейшей передачи заболеваний, сцепленных с полом
• определение резус-принадлежности для исключения развития у ребенка гемолитической болезни

При этом основными показаниями к проведению ПГД являются:

• возраст родителей (матери — старше 35, отца — старше 40 лет)
• носительство генетических и хромосомных патологий в половых клетках
• серьезные нарушения сперматогенеза (олигозооспермия, азооспермия, олигоастенотератозооспермия)
• наличие двух и более неудачных попыток ЭКО
• привычное невынашивание беременности (более двух самопроизвольных выкидышей)
• смерть детей от предыдущих беременностей в результате резус-конфликта

С помощью ПГД у эмбриона можно выявить:

• болезнь Гоше
• анемию Фанкони
• болезнь Геттингтона
• торзионную дистонию
• нейрофиброматоз
• поликистоз почек
• синдромы Дауна, Эдвардса,Альперта, Х-ломкой хромосомы
• муковисцидоз
• гемофилию
• фенилкетонурию
• пигментозный ретинит
• миодистрофию
• ретинобластому
• пузырчатку
• миопатию
• ахондроплазию
• многие другие генетические заболевания

Как проводится ПГД?

Проведение предимплантационной генетической диагностики возможно только в цикле ЭКО/ИКСИ. Связано это с тем, что во время стандартного ЭКО к яйцеклетке добавляют большое количество мужских половых клеток, и во время забора материала в анализ могут попасть не только клетки эмбриона, но части сперматозоидов, не участвовавших в оплодотворении.

Методами, используемыми для диагностики, могут быть:

• метод FISH (применяется при числовых и структурных хромосомных нарушениях — анеуплодиях и транслокациях — для предотвращения самопроизвольного аборта и повышения вероятности наступления беременности)
• метод ПЦР (применяется для выявления моногенных заболеваний, если один или оба родителя являются их носителями или страдают ими) Для проведения ПГД необходимы исследования супругов на предмет выявления их генных дефектов. При неустановленных мутациях, а также при неясном характере наследования генетических проблем проведение ПГД невозможно.

 

Данная диагностика проводится на том этапе развития эмбриона, когда его клетки еще не взяли на себя какие-либо функции нового организма и в дальнейшем безопасно могут быть замещены другими при делении.

Биопсия не приводит к возникновению пороков у ребенка, а риск случайного повреждения зародыша составляет менее 1%.

В полость матки с большой долей вероятности переносятся только здоровые эмбрионы, и вопроса о необходимости прерывания беременности из-за генетики в дальнейшем не возникает.

Стоимость преимплантиционной генетической диагностики 34 500 30 000 руб.

Для проведения данной процедуры необходима консультация специалиста. Телефон для записи на консультацию 8(3452) 21-85-13

Генетика | Клиника "Надия"

НАИМЕНОВАНИЕ УСЛУГИ

СТОИМОСТЬ, ГРН

Молекулярно-диагностические исследования

Выделение и хранение ДНК из лейкоцитов периферийной крови

435,00

Определение зиготности гена RHD

2 180,00

Определение мутаций генов BRCA1 и BRCA2

2 800,00

ДНК-диагностика неустановленной мутации (І ст. сложности)

8 000,00

ДНК-диагностика неустановленной мутации (ІІ ст. сложности)

16 000,00

ДНК-диагностика неустановленной мутации (ІІІ ст. сложности)

24 000,00

ДНК-диагностика микроделеций Y-хромосомы

1 550,00

ДНК-диагностика микроструктурных хромосомных аномалий методом сравнительной геномной гибридизации

39 035,00

Предимплантационная генетическая диагностика, сравнительная геномная гибридизация, 24 хромосомы, количество эмбрионов не больше 8-ми

49 000,00

Предимплантационная генетическая диагностика, сравнительная геномная гибридизация, 24 хромосомы, количество эмбрионов не больше 8-ми, без биопсии бластоцисты/бластомера

46 100,00

Предимплантационная генетическая диагностика: сравнительная геномная гибридизация, 24 хромосомы, за каждый дополнительный эмбрион свыше 8-ми.

7 000,00

Предимплантационная генетическая диагностика методом ПЦР (I ст. сложности)

8 000,00

Предимплантационная генетическая диагностика методом ПЦР (ІI ст. сложности)

16 000,00

Предимплантационная генетическая диагностика методом ПЦР (ІII ст. сложности)

24 000,00

ДНК-диагностика муковисцидоза

1 740,00

ДНК-диагностика нейросенсорной несиндромальной тугоухости (ген GJB2)

975,00

ДНК-диагностика синдрома Мартина-Белл (ломкой X -хромосомы)

5 220,00

ДНК-диагностика спинальной мышечной атрофии

1 010,00

ДНК-диагностика фенилкетонурии

1 380,00

Неинвазивная пренатальная ДНК-диагностика резус-фактора плода (по крови беременной)

6 430,00

Пренатальная ДНК-диагностика нейросенсорной несиндромальной тугоухости (по ворсинам хориона или амниоцитам)

4 330,00

Пренатальная ДНК-диагностика муковисцидоза (по ворсинам хориона или амниоцитам)

4 660,00

Пренатальная ДНК-диагностика синдрома Мартина-Белл или ломкой Х-хромосомы (по ворсинам хориона или амниоцитам)

7 650,00

Пренатальная ДНК-диагностика спинальной мышечной атрофии (по ворсинам хориона или амниоцитам)

3 950,00

Пренатальная ДНК-диагностика принадлежности резуса эмбриона (по ворсинам хориона или амниоцитам)

3 990,00

Пренатальная ДНК-диагностика фенилкетонурии (по ворсинам хориона или амниоцитам)

4 210,00

Пренатальное определение пола плода при Х-сцепленных заболеваниях (по ворсинам хориона или амниоцитам)

1 290,00

ДНК-тест на материнскую контаминацию

3 790,00

Программа для будущих родителей «Генетическое здоровье» (ДНК-диагностика муковисцидоза, ДНК-диагностика фенилкетонурии, ДНК-диагностика спинальной мышечной атрофии, ДНК-диагностика нейросенсорной несиндромальной тугоухости (ген GJB2))

4 760,00

HLA-типирование (2 лица)

13 310,00

HLA-типирование (1 лицо)

6 740,00

PrenaPlan Plus- ДНК-тестирование носительства скрытой генной патологии (NGS)

17 095,00

Verifi Prenatal — неинвазивная ДНК-диагностика хромосомных аномалий плода (по крови беременной), отправление материала с понедельника по утро четрерга (до 10:00)

12 900,00

Verifi Prenatal — (дополнительная опция) неинвазивная ДНК-диагностика микроделеций

1 740,00